比活性是指单位毫克蛋白质的生物学活性单位，这是重组蛋白质药物不同于化学药的一项重要指标。由于蛋白质的活性不能常规测定，蛋白质空间结构的改变特别是二硫键的错误配对，可影响蛋白质的生物学活性，从未影响蛋白质的药效，比活性可以间接的反映这一情况。例如，人白细胞介素-2的比活性应为10的7次方U/mg，如果某批人白细胞介素-2的比活性仅为10的6次方U/mg，这就说明这批产品中90%的蛋白质不具有正常的活性或已灭活。进行比活性项目的检测，不仅可以反映产品生产工艺的稳定情况，而且可以比较不同表达体系、不同生产厂家生产同一产品的质量情况。比活性高说明产品的生产工艺更先进、纯度更高、质量更优。
比活性的正确测法
1、去垂体大鼠体重法
本法系通过比较生长激素标准品(S )与供试品(T )对幼龄去垂体大鼠体重增加的程度，以测定供试品效价的一种方法。
标准品溶液的制备 试验当日，取标准品，按标示效价用含牛血清白蛋白的0 .9% 氯化钠溶液，制成髙、低两种浓度的标准品溶液。一般高浓度标准品溶液配成每lm l含0. 1?0. 2 IU ,低浓度标准品溶液配成每lm l含0.025?0 .0 5 IU ,高低两浓度比值(r )一般为1 : 0 .2 5，标准品溶液分装成每天剂量并密封于一15°?C以下保存，临用时融化。
供试品溶液的制备 按供试品的标示效价或估计效价(A t ) , 照标准品溶液的制备及保存方法制备和保存。
测定法 取同一来源、品系，出生26?28天，体重60?80g，同一性别，健康的大鼠，试验前2?3 周手术摘除垂体，手术后于屏障环境饲养使其恢复。取去垂体手术后2?3 周、体重变化小于手术前士 10%的大鼠，按体重随机等分成4组，每组至少8只，每只编号并记录体重。分别自颈部皮下注射一种浓度的标准品溶液或供试品溶液0.5ml，每日1 次，连续6日。于后1 次给药后2 4小时，处死大鼠，称体重，必要时实验结束后可进行尸检，切开蝶鞍区，肉眼检査有无垂体残留，剔除有垂体残存的大鼠。每只动物给药后体重增加的克数作为反应值。供试品与标准品各剂量组所致反应的平均值应相当。照生物检定统计法(通则1431) 中的量反应平行线测定法计算效价及实验误差。
本法的可信限率(F L% )不得大于50%。
2 .去垂体大鼠胫骨法
本法系通过比较生长激素标准品(S )与供试品(T )对去垂体大鼠胫骨骨骺板宽度增加的程度，以测定供试品效价的一种方法。
标准品溶液和供试品溶液的制备同体重法。
测定法 本法可与去垂体大鼠体重法同步进行。待体重法实验结束后，取下两腿胫骨，置10%甲醛溶液保存，从胫骨近心端顶部中间沿矢状面切开，置10% 甲醛溶液中保存，水洗10分钟后，置丙酮溶液中10分钟，水洗3分钟，置2%硝酸银溶液中染色2分钟，水洗后置水中强光照射至变棕黑色，于10%硫代硫酸钠溶液固定30秒钟，置80%乙醇溶液中供测量用。测量时沿刨面切lm m 左右薄片，置显微镜下测量胫骨骨骺板宽度，作为反应值。照生物检定统计法(通则1431) 中的量反应平行线测定法计箅效价及实验误差。
本法的可信限率(F L% )不得大于50%。
数据来源-《两种不同剂型重组人生长激素在体生物活性比较》
-1.王亚敏，国家食品药品监督管理局。药品审评中心，北京100038;
-2.李湛军，中国药品生物制品检定所北京10005;
金赛水剂数批次平均比活性达到了3.87，粉剂数批次平均比活性达到了3.25，20年前赛增粉剂比活性就已达到3.0，并一直被中检所选为生长激素粉剂国家质量标准品。 |
